Le rôle des protéines à ancre GPI chez Candida albicans dans les interactions hote/pathogène - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2006

role of the GPI anchored proteins in Candida albicans in host/pathogen interactions

Le rôle des protéines à ancre GPI chez Candida albicans dans les interactions hote/pathogène

Résumé

Candida albicans is the fungal pathogen isolated most frequently in nosocomial infections and in hemocultures. Our proposal in this thesis was to extend our knowledge on one particular class of cell surface proteins: GPI (Glycosyl Phospho Inositol)-anchored proteins (GpiP). Gpi7p has been demonstrated by our group to participate in the proper anchoring of GPI-dependent cell wall proteins to the cell wall and also suggested that GPI anchored proteins (GAP) might be involved in macrophage interactions especially in fungal survival after phagocytosis. In the C. albicans genome, 104 putative GPI anchored proteins have been identified but the role of about half of them remains unknown. These observations altogether suggest that GAPs might be excellent targets to study host-pathogen interactions. For this study we used two approaches. The first strategy was to generate null mutants of the putative GPI anchored proteins, then characterize their phenotype in vitro and finally screen each of the mutants for its interaction with macrophages. This global approach was conducted on the 47 mutants gathered and permitted us to classify GAPs in three main functional categories: (i) morphogenesis, (ii) stress response and (iii) cell wall integrity and caspofungin sensitivity. The screen for mutant altered in their resistance to phagocytosis did not give any clear results, probably because the conditions tested were too mild. In the second approach, we used the mutant gpi7-/- to study the effects of some cell wall proteins mislocalisation in the interaction of the fungus with the innate host defences. We found that in the absence of Gpi7p, C. albicans elicited a stronger in vitro TNF-Α production by macrophages and a stronger recruitment of neutrophils in vivo at the site of infection. These findings suggest the strongly modified cell wall of gpi7-/- is better recognized by the immune system inducing a stronger proinflammatory response. None of these effects seem to be mediated by the TLR2 and TLR4 receptors.
Candida albicans est le premier pathogène fongique chez l'homme (avec 78 % des infections). Nous avons choisi d'étudier, chez cette levure diploïde, les protéines de surface ancrées à la membrane et/ou à la paroi par une ancre Glycosylphosphatidylinositol (GPI). Des expériences antérieures au laboratoire ont montré que l'absence de Gpi7p (une enzyme de la voie de biosynthèse de l'ancre GPI) affectait l'ancrage des protéines à ancre GPI (GpiP) pariétales, l'intégrité de la paroi et la virulence de C. albicans. Outre le fait d'être localisées à la surface, plus de 60 % des 104 GpiP n'ont pas d'orthologue connu. Toutes ces données nous laissent penser que cette classe de protéines pourrait jouer un rôle clé dans les interactions de C. albicans avec son environnement. L'étude, présentée dans cette thèse, a été menée selon deux approches. La première consistait à interrompre un maximum de gènes codant des GpiP, puis à étudier le phénotype associé à ces invalidations pour ensuite cribler ces mutants GpiP pour les interactions macrophage-C. albicans in vitro. Cette approche globale nous a permis de construire une banque de mutants relativement importante ; son étude phénotypique montre que les GpiP sont impliquées dans trois grandes catégories fonctionnelles : (i) la morphogenèse, (ii) la réponse au stress et (iii) l'intégrité de la paroi avec la sensibilité à la caspofungine. Le crible pour des mutants atteints dans leur résistance à la phagocytose ne nous a pas permis d'obtenir des résultats clairs, probablement à cause des conditions testées qui n'étaient pas assez stringentes. La seconde approche consistait à étudier l'impact de la mauvaise localisation de certaines protéines pariétales, en utilisant le mutant gpi7-/-, sur la réponse innée de l'hôte face à C. albicans. Nos expériences montrent très clairement que le mutant gpi7-/- induit une très forte production de TNFΑ par les macrophages accompagnée d'un recrutement accru de neutrophiles au site de l'infection. Cette étude suggère qu'en l'absence de Gpi7p, la paroi de C. albicans serait mieux reconnue par les phagocytes mais que cette reconnaissance n'impliquerait pas les récepteurs TLR2 et TLR4.
Fichier principal
Vignette du fichier
theseArmelPlaine18decembre2006_version_TEL.pdf (26.88 Mo) Télécharger le fichier

Dates et versions

tel-00131148 , version 1 (15-02-2007)

Identifiants

  • HAL Id : tel-00131148 , version 1

Citer

Armêl Plaine. Le rôle des protéines à ancre GPI chez Candida albicans dans les interactions hote/pathogène. Biologie cellulaire. Institut national agronomique paris-grignon - INA P-G, 2006. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00131148⟩
736 Consultations
596 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More