Spécificité antigénique de l'Als3p de Candida albicans et implication de cette protéine dans l'interaction avec les constituants de l'hôte - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2007

Antigenic specificity of Candida albicans Als3p and implication of this protein in interaction with host components.

Spécificité antigénique de l'Als3p de Candida albicans et implication de cette protéine dans l'interaction avec les constituants de l'hôte

Résumé

Candida albicans is a commensal polymorphic yeast of the oral cavity and digestive tract which can cause severe infections, especially in immunocompromised patients. During pathogenic process, blastoconidia are generally observed in association with hyphae. Monoclonal antibody 3D9.3 (MAb 3D9.3) reacts with surface of Candida albicans germ tubes and recognizes a proteinic epitope carried by 3D9 antigen (3D9 Ag). We demonstrated that 3D9 epitope was localized on mycelium of the only C. albicans species. 3D9 Ag was purified and presents, by western blot, two intense bands at 140 and 180 kDa. Analysis by mass spectrometry allowed us to prove that Als3 protein was present in these two bands. Negative result of MAb 3D9.3 reactivity against an als3∃ /als3mutant strain and anti-Als3p serum reactivity against purified 3D9 antigen demonstrate that 3D9 Ag corresponds to Als3p. Moreover, we demonstrated that 3D9 epitope was present in Als3 proteins encoded by the two ALS3 alleles. Interaction assays was performed between Als3p and host components. MAb 3D9.3 inhibits interaction of germ tubes and human umbilical vein endothelial cells and buccal epithelial cells. Finally, analysis of strain deleted for ALS3 gene shows that Als3p was one of adhesins involved in direct interaction between germ tubes and washed resting blood platelets. Platelet receptor involved in binding of resting platelets to Als3p remains to be identified.
Candida albicans est une levure polymorphique commensale de la cavité buccale et du tractus digestif qui peut entrainer des infections sévères particulièrement chez les patients immunodéprimés. A l'état pathogène, les formes blastospores sont généralement observées en association avec des éléments filamenteux. L'anticorps monoclonal 3D9.3 (AcM 3D9.3) réagit avec la surface des tubes germinatifs de C. albicans et reconnait un épitope protéique porté par l'antigène 3D9 (Ag 3D9). Nous avons montré que l'épitope 3D9 est présent uniquement sur les éléments mycéliens de la seule espèce C. albicans. L'Ag 3D9 a été purifié et présente, en Western-Blot, deux zones de marquage plus intense à 140 et 180 kDa. L'analyse par spectrométrie de masse a permis de montrer que la protéine Als3 était présente dans ces deux zones. L'absence de réactivité de l'AcM 3D9.3 sur une souche mutée pour le gène ALS3 et la réactivité d'un sérum anti-Als3p sur l'Ag 3D9 purifié démontre que l'Ag 3D9 correspond à la protéine Als3. De plus, nous avons montré que l'épitope 3D9 était présent dans les protéines Als3p codées par les deux allèles ALS3. Des études d'interactions entre l'Als3p et les constituants de l'hôte ont été réalisées. L'AcM 3D9.3 inhibe l'interaction des tubes germinatifs avec les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine et les cellules épithéliales buccales. De plus, l'étude d'une souche mutée pour le gène ALS3 montre que l'Als3p est une des adhésines participant à l'interaction directe entre les tubes germinatifs et les plaquettes sanguines natives lavées. Il reste désormais à identifier le récepteur plaquettaire responsable de la fixation des plaquettes natives sur l'Als3p.
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Dates et versions

tel-00346346 , version 1 (11-12-2008)

Identifiants

  • HAL Id : tel-00346346 , version 1

Citer

Bertrand Beucher. Spécificité antigénique de l'Als3p de Candida albicans et implication de cette protéine dans l'interaction avec les constituants de l'hôte. Biologie cellulaire. Université d'Angers, 2007. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00346346⟩
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