Assemblages 2D de l'Annexine A5 : Applications biotechnologiques & Aspects fonctionnels - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2007

Assemblages 2D de l'Annexine A5 : Applications biotechnologiques & Aspects fonctionnels

Résumé

Annexin A5 (Anx5) is an annexin family member protein which presents the property to self-assemble on the phospholipid bilayer surface and to form bi-dimensional (2D) organization of trimers. This work concerns on one hand the development of biotechnological applications for Anx5 2D assemblies and on another hand the study of the functional properties of these 2D assemblies. These works were realized with two principal methods of quartz crystal microbalance with dissipation monitoring (QCM-D) and atomic force microscopy (AFM).
The first part of this thesis concerns the development of anchoring platforms based on 2D assemblies of Anx5 derived proteins. Covalent complexes between Anx5 and cellular adhesion peptides were the base of the cellular anchoring platform realization. Fusion proteins between Anx5 and the ZZ fragment of protein A of Staphylococcus aureus was used to develop 2D platforms for controlled immobilization of antibodies and proteins.
The second part of this thesis concerns the study of functional properties of Anx5 2D assemblies. Studies of the interaction between an anti-phospholipid antibody from a patient presenting the anti-phospholipid syndrome and Anx5 2D assemblies show that this antibody can coexist with Anx5 without perturbing crystalline organization of these Anx5 2D assemblies. The second study concerns influence of these Anx5 2D assemblies on the SLB dynamic. A correlation is established between trimers formation and the membrane's dynamic decrease.
These works contribute to our understanding of Anx5 2D assemblies' properties and to think to biosensor development for cells or molecules.
L'Annexine A5 (Anx5) est une protéine de la famille des annexines qui présente la propriété de s'organiser à la surface des bicouches lipidiques en trimères et en assemblages bidimensionnels (2D) de trimères. Ce travail de thèse concerne le développement d'applications biotechnologiques des assemblages 2D d'Anx5 ainsi qu'une étude des propriétés fonctionnelles de ces assemblages. Ces travaux ont été réalisés principalement à l'aide des méthodes de la microbalance à cristal de quartz avec mesure de dissipation (QCM-D) et de la microscopie à force atomique (AFM).
La première partie de cette thèse concerne le développement de plates-formes d'ancrage basées sur des assemblages 2D de protéines dérivées de l'Anx5. Des complexes covalents entre l'Anx5 et des peptides d'adhésion cellulaire pour la réalisation de plates-formes d'ancrage de cellules. Des protéines de fusion entre l'Anx5 et un fragment de la protéine A ont d'autre part servi au développement de plates-formes 2D pour l'immobilisation contrôlée d'anticorps et de protéines.
La seconde partie de cette thèse concerne l'étude des propriétés fonctionnelles des assemblages 2D d'Anx5. L'étude de l'interaction d'un anticorps anti-phospholipide avec les assemblages 2D d'Anx5 montre que cet anticorps ne perturbe pas l'organisation 2D de l'Anx5. La seconde étude concernant l'influence des assemblages 2D de l'Anx5 sur la dynamique des bicouches lipidiques établie une corrélation entre la formation de trimères et le ralentissement de la dynamique des membranes.
Ces travaux contribuent à notre compréhension des propriétés des assemblages 2D d'Anx5 et permettent d'envisager le développement de biocapteurs pour cellules ou molécules.
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Dates et versions

tel-00363598 , version 1 (23-02-2009)

Identifiants

  • HAL Id : tel-00363598 , version 1

Citer

Rémi Berat. Assemblages 2D de l'Annexine A5 : Applications biotechnologiques & Aspects fonctionnels. Biochimie [q-bio.BM]. Université Sciences et Technologies - Bordeaux I, 2007. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00363598⟩

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