Characterization of mechanisms involved in rickettsia pathogenicity - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2011

Characterization of mechanisms involved in rickettsia pathogenicity

Résumé

Rickettsiae are characterized by their strictly intracellular location, as Gram-negative bacteria growing only within the eukaryotic host cell cytoplasm. Accordingly, the molecular mechanisms responsible for invasive mechanisms are largely unknown. Adhesion is a key step for bacterial invasion of host tissues and involves the rickettsial outer membrane proteins rOmpA and rOmpB, known for a long time as major rickettsial cell surface antigens. The aim of this thesis was to gain a better understanding of another newly identified rickettsial adhesin from Rickettsia prowazekii, called Adr2. This task was achieved through the production of a monoclonal antibody (mAb) specific for the recombinant protein and that allowed localization of Adr2 at the bacterial cell surface. The inhibition of rickettsiae-induced cytotoxicity with this mAb confirmed the role of Adr2 in the invasion process. Considering the putative role of the actin-based motility in the pathogenesis of the spotted fever group rickettsiae (SFG), we then focused our second part of work on the localization of RickA, a protein specific for the SFG rickettsiae and thought to be responsible for bacterial motility. Immunofluorescence assay combined with a immunogold electron microscopy yielded good-resolution images and showed a non-polarized expression of RickA that was found onto the entire bacterial surface of Rickettsia conorii. Finally, twenty recombinant proteins targets were screened with sera of patients infected with various rickettsiae. We thus evidenced several putaive markers allowing to discriminate infection caused either by Rickettsia typhi or by Rickettsia conorii. On the overall, we believe that our results improve the knowledge about the pathogenicity of bacteria from the Rickettsia genus.
Les rickettsies sont de petites bactéries à Gram-négatif associées à différentes espèces d'arthropodes. Leur nature intracellulaire stricte a longtemps été un obstacle à la compréhension des mécanismes moléculaires responsables de leur pathogénicité qui restent mal connus. L'adhésion bactérienne, qui est une étape clef de l'invasion des tissus de l'hôte, met en jeu les protéines rOmpA et rOmpB (rickettsial outer membrane proteins), identifiées depuis longtemps comme des antigènes de surface majeurs des rickettsies. L'objectif de cette thèse a été de caractériser une autre adhésine potentielle de Rickettsia prowazekii récemment identifiée, soit Adr2. La stratégie mise en œuvre a été basée sur la production d'anticorps monoclonaux spécifiques de cette protéine, dont une forme recombinante a été exprimée. Cet outil a permis, non seulement de localiser Adr2 à la surface des rickettsies, mais aussi d'apporter la preuve de son rôle dans le phénomène invasif puisque les anticorps anti-Adr2 diminuent significativement la cytotoxicité des rickettsies sur les cellules épithéliales. Un autre aspect de la pathogénicité que nous avons abordé concerne la mobilité des rickettsies du groupe boutonneux, fonction attribuée à la protéine RickA lorsque ce travail a été initié. La résolution des images obtenues par immunofluorescence, ou par microscopie électronique après marquage immunogold, montrent que l'expression de RickA est non-polarisée et répartie sur la surface entière de Rickettsia conorii. Enfin, plusieurs protéines recombinantes ont été utilisées dans des tests de screening sérologiques avec des sérums de patients infectés par diverses rickettsies, avec des résultats encourageants. L'ensemble de ces résultats contribue à une meilleure connaissance de la pathogénicité des bactéries du genre Rickettsia.
Fichier principal
Vignette du fichier
final_thA_se.pdf (2.98 Mo) Télécharger le fichier
Loading...

Dates et versions

tel-00640585 , version 1 (14-11-2011)

Identifiants

  • HAL Id : tel-00640585 , version 1

Citer

Manohari Vellaiswamy. Characterization of mechanisms involved in rickettsia pathogenicity. Infectious diseases. Université de la Méditerranée - Aix-Marseille II, 2011. English. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00640585⟩

Collections

IRD CNRS UNIV-AMU
233 Consultations
924 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More