Cytochromes P-450 et Activation Metabolique du Noyau Thiophene : exemple de l'acide tiénilique et de ses dérivés. - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 1992

Cytochromes P450 and Metabolic Activation of the Thiophen Ring : Example of tienilic acid and derivatives

Cytochromes P-450 et Activation Metabolique du Noyau Thiophene : exemple de l'acide tiénilique et de ses dérivés.

Résumé

Tienilic acid (TA) is a diuretic drug responsible for autoimmune hepatitis in a few subjects. The sera of patients contains autoantibodies called anti-LKM2 which recognize cytochromes P450's. These P450's also catalyze the metabolic activation of TA and its isomer (TAI). The first part of t only be derived fromhis study concerns the determination of the reactive intermediate of TAI by trapping it with mercaptoethanol in vitro in rats. Two dihydrothiophene sulfoxides have been fully characterized. They can only derive drom a new reactive metabolite : a thiophene sulfoxide intermediate. The involvement of cytochrome P450's in the thiophene sulfoxide formation of TAI has been generalized both in vivo in rats and in vitro in human. In that case human microsomes and yeast microsomes expressing human P450 IIC9 and IIC10 were able to produce the same reactions with TA and TAI as substrates. The second part describes the haptenization of bvine serumalbumin with TA. This protein injected to rabbits produces the formation of antibodies which recognize TA or TAI bound covalently to proteins as shown by Elisa. These antibodies should be an efficient tool to investigate covalent binding of TA and TAI to P450's.
L'acide tiénilique (AT) est un diurétique responsable d'hépatite autoimmunes. Dans le sérum des patients on retrouve des autoanticorps (anti-LKM2) dirigés contre les cytochromes P450 impliquées dans la métabolisation de l'AT et de son isomère (TAI) La première partie concerne la détermination de la nature de l'entité réactive du TAI au moyen d'un piègeage par le mercaptoethanol. Deux sulfoxydes des dihydrothiophène ont été caractérisés qui nous permettent de proposer un sulfoxyde de thiophène. En présence d'un excès de mercaptoethanol, ces deux métabolites de piègeage évoluent en une succession de plusieurs métabolites. Afin de généraliser à l'ensemble des cytochromes P-450 , nous avons mis en évidence ce nouveau métabolisme successivement in vivo chez le rat, in vitro chez l'homme, et dans un système modèle constitué par des microsomes de levures Saccharomyces cerevisiae recombinées exprimant le P-450 IIC9 ou le P450 IIC10. Ces 2 cytochromes P450 possèdent une activité d'oxydation vis à vis de l'AT et du TAI. Dans la deuxième partie de ce travail nous avons fixé l'AT sur de la sérumalbumine de boeuf. La protéine obtenue est immunogène chez le lapin et les anticorps obtenus (anti-ATles métabolites de l'AT et du TAI fixés ) reconnaissent en Elisa de façon covalente sur les protéines microsomales. Ces anticorps seront un outil puissant pour étudier la fixation covalente des métabolites de l'AT .
Fichier principal
Vignette du fichier
PhilippeValadon_ThesePARISVI_1992.pdf (10.86 Mo) Télécharger le fichier

Dates et versions

tel-00651961 , version 1 (14-12-2011)

Identifiants

  • HAL Id : tel-00651961 , version 1

Citer

Philippe Valadon. Cytochromes P-450 et Activation Metabolique du Noyau Thiophene : exemple de l'acide tiénilique et de ses dérivés.. Chimie organique. Université Pierre et Marie Curie - Paris VI, 1992. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00651961⟩
328 Consultations
67 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More