Identification de mécanismes de régulation des fonctions des interférons: Rôle de la palmitoylation du récepteur de l'interféron de type I - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2008

Identification of regulatory mechanisms of interferons functions: role of the type I interferon receptor palmitoylation

Identification de mécanismes de régulation des fonctions des interférons: Rôle de la palmitoylation du récepteur de l'interféron de type I

Julie Claudinon
  • Fonction : Auteur
  • PersonId : 857427

Résumé

Type I interferons (IFNs) play key roles in mediating innate and acquired immune responses, in host defense against viral infections, and exhibit antiproliferative and tumoricidal activity. Through the binding to their shared cell surface receptor, composed of the two subunits IFNAR1 and IFNAR2, they induce the JAK/STAT signaling cascade, thus leading to their biological effects. The goal of my thesis was to identify regulatory mechanisms of IFNs signaling. In this context, we analyzed the role of protein palmitoylation, a lipid modification which is known to be involved in trafficking and signaling of proteins. We found that pharmacological inhibition of palmitoylation results in severe defects of IFN receptor endocytosis and signaling. We generated mutants of IFNAR1 where each or both of the two cysteines present in the cytoplasmic domain were replaced by alanines. We found that only Cys463, the most proximal of the two cytoplasmic cysteines, is palmitoylated. A thorough microscopic and biochemical analysis of the palmitoylation-deficient IFNAR1 mutant revealed that IFNAR1 palmitoylation is not required for receptor endocytosis, intracellular distribution, or stability at the cell surface. Nevertheless, the lack of IFNAR1 palmitoylation results in major defects in JAK/STAT signaling and gene transcription activated by IFN-a. Suprisingly, it had no effect on IFN-a antiproliferative activity, in spite of the importance of palmitoylation for signaling.
Les interférons (IFNs) de type I sont des cytokines qui jouent un rôle capital dans les défenses immunes, antivirales et antiprolifératives de l'organisme. En se liant à leur récepteur de surface, composé des deux sous-unités IFNAR1 et IFNAR2, ils induisent la cascade de signalisation JAK/STAT qui aboutit à leur effets biologiques. L'objectif de ma thèse était d'identifier des mécanismes de régulation de la signalisation des IFNs. Dans ce contexte, nous nous sommes intéressés à la palmitoylation du récepteur de l'IFN de type I, une modification lipidique souvent impliquée dans le trafic et la signalisation des protéines. Par marquage métabolique au palmitate tritié, nous avons montré qu'IFNAR1 et IFNAR2 sont palmitoylées. Le domaine cytoplasmique d'IFNAR1 contient deux cystéines, Cys463 et Cys502, qui sont des sites potentiels de palmitoylation. A l'aide de mutants sur chacune de ces cystéines, nous avons montré qu'IFNAR1 est palmitoylée uniquement sur sa cystéine la plus proche de la membrane plasmique, la Cys463. Un mutant non palmitoylé dans lequel cette cystéine a été remplacée par une alanine nous a permis de constater que la palmitoylation d'IFNAR1 n'est pas impliquée dans son trafic intracellulaire, dans son endocytose ni dans sa stabilité, mais qu'en revanche elle joue un rôle crucial dans l'activation de la voie de signalisation JAK/STAT. De façon concordante, la palmitoylation d'IFNAR1 est requise pour l'activation transcriptionnelle des gènes induits spécifiquement par l'IFN-a. Par contre, un défaut de palmitoylation n'influence nullement l'activité antiproliférative de l'IFN-a, en dépit du rôle de cette modification dans la signalisation.
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Dates et versions

tel-00354695 , version 1 (20-01-2009)

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  • HAL Id : tel-00354695 , version 1

Citer

Julie Claudinon. Identification de mécanismes de régulation des fonctions des interférons: Rôle de la palmitoylation du récepteur de l'interféron de type I. Sciences du Vivant [q-bio]. Université Paris Sud - Paris XI, 2008. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00354695⟩
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