Characterization of populations enriched for hematopoietic stem cells in the placenta and yolk sac during embryonic development
Caractérisation des populations enrichies en cellules souches hématopoïétiques dans le placenta et le sac vitellin au cours du développement embryonnaire
Résumé
In mice, little is known about the surface markers that characterize embryonic hematopoietic stem cells (HSCs). During my PhD, I have studied in the placenta (Pl) and the yolk sac (YS) three populations (CD34+c-kithi, CD144+CD45+ and Sca-1+AA4.1+) that have already been described as enriched in HSCs in other contexts. The whole project shows that enrichment in HSCs do not involve the same markers according to the tissue concerned: in sites of emergence (AGM) and emergence/amplification of HSCs (YS), the most enriched population in HSCs is the CD144+CD45+ one; in the Pl, an amplification organ of HSCs, the best one is the CD34+c-kithiSca-1+ population, whereas in the fetal liver (FL), an amplification/differentiation organ of HSCs, it is the CD34+c-kithiSca-1+AA4.1+ one. Molecular analysis of these populations will reveal specific regulatory molecules concerning the emergence and amplification of HSCs. In addition, we have used VECR transgenic mice to study the origin of CD34+c-kithi HSCs from Pl at E11.5, and it seems that all cells of this population are not derived from the endothelium. Preliminary results performed on Mpl-/- mice, which show a defect in HSCs content in the Pl and the FL, indicate that at E11.5, the hematopoietic potential of CD34+c-kithi population in Mpl-/- Pl is lower than the CD34+c-kithi population in wild type Pl, and this difference is no more visible at E12.5. Thus, the Pl appears to be a transient niche of HSCs amplification/maturation, but it also remains possible that it can be able to directly produce HSCs
Chez la souris, peu de choses sont connues sur les marqueurs de surface qui caractérisent les cellules souches hématopoïétiques (CSHs) embryonnaires. Durant ma thèse, j'ai étudié au niveau du placenta (Pl) et du sac vitellin (SV) les populations CD34+c-kithi, CD144+CD45+ et Sca-1+AA4.1+, déjà décrites comme enrichies en CSHs dans d'autres contextes. Le projet dans son ensemble a permis de montrer que l'enrichissement en CSHs n'implique pas les mêmes marqueurs selon le tissu considéré : dans les sites d'émergence (AGM) et d'émergence/amplification des CSHs (SV), la population la plus enrichie en CSHs a pour phénotype CD144+CD45+ ; concernant le Pl, organe d'amplification des CSHs, elle a pour phénotype CD34+c-kithiSca-1+ alors que dans le foie fœtal (FF), organe d'amplification/différenciation des CSHs, elle a pour phénotype CD34+c-kithiSca-1+AA4.1+. L'analyse moléculaire de ces populations permettra de révéler des molécules régulatrices spécifiques de l'émergence et de l'amplification des CSHs. Par ailleurs, nous avons utilisé les souris transgéniques VECR pour étudier l'origine des CSHs CD34+c-kithi du Pl et il semblerait qu'à E11.5, toutes ne proviennent pas de l'endothélium. Les résultats préliminaires réalisés sur les souris Mpl-/-, qui présentent un défaut de contenu en CSHs dans le Pl et le FF, indiquent qu'à E11.5, le potentiel hématopoïétique de la population CD34+c-kithi du Pl Mpl-/- est inférieur à celui de la population CD34+ckithi du Pl C57Bl6 ; cette différence n'est plus visible à E12.5. Le Pl constitue donc une niche transitoire d'amplification/maturation des CSHs mais il est possible qu'il puisse également produire des CSHs