La réparation de cassures d’ADN double brins par recombinaison homologue nécessite la formation d’intermédiaires multibrins qui peuvent être le lieu de formation de crossovers après résolution par des nucléases. La modification de protéines par ubiquitine et SUMO est un mode de contrôle répandu parmi les protéines de la réparation de l’ADN. De plus, certaines protéines de la réparation de cassures double brins interagissent entre elles, lorsqu’elles sont sumoylées, par le biais de motifs d’interaction avec SUMO (SIMs). La nucléase Yen1 subit un contrôle rigoureux lors du cycle cellulaire dans le but de limiter la formation de crossover et ainsi de préserver l’intégrité du génome. Dans ce manuscrit, il sera mis en évidence que Yen1 est régulé de surcroit par l’ubiquitination, la sumoylation et enfin l’interaction non covalente avec le modificateur SUMO via ses SIMs désormais découverts. Yen1 est sumoylé par les SUMO ligases Siz1 et Siz2, d’autant plus en conditions de dommages à l’ADN. En plus de quoi, Yen1 est un substrat de l’ubiquitine ligase Slx5-Slx8. En absence de cette dernière, la fraction sumoylée de Yen1 persiste, ce qui mène à la localisation durable de Yen1 en accumulation ponctuelle dans le noyau. L’ubiquitination de Yen1 par Slx5-Slx8 a surtout lieu à la lysine 714. Une mutation de cette lysine augmente la formation de crossovers, et annule également les défauts de ségrégation des chromosomes qui peuvent avoir lieu en l’absence d’autres nucléases. D’autre part, l’action nucléolytique de Yen1 ne s’effectue correctement que lorsque celui-ci peut interagir de façon non covalente avec des partenaires sumoylés. Des mutations dans les SIMs de Yen1 réduisent sa capacité à découper et résoudre les intermédiaires de la recombinaison, ce qui donne lieu à une augmentation de l’instabilité génomique et de la mauvaise ségrégation des chromosomes.