Development of an SPR microscope for phase imaging with digital holography
Développement d'un microscope SPR pour imagerie de phase par holographie numérique
Abstract
Surface plasmon resonance microscopy (SPRM) is a label-free technique that is capable of real-time imaging of biological and chemical activities at metal-dielectric interfaces. Recently, such a technique has been combined with digital holography (SPR-DHM), which allows real-time imaging of the phase response of surface plasmon resonance (SPR). It has a higher stability and sensitivity than the intensity based SPRM. We have designed and built a novel SPR-DHM using a near-infrared (NIR) laser diode. Since the NIR source reduces the resonance angle, an objective with NA of about 1.42 has been employed instead of the conventionally used extremely high NA objectives. As a result, it is much more cost-effective. The proposed NIR SPR-DHM has been tested on gold-air and gold-water interfaces. The SPR holograms have been successfully recorded and reconstructed. A high potential of the NIR SPR-DHM for biological imaging is expected.
La microscopie à résonance du plasmon de surface est une technique de microscopie sans marquage qui est capable d’imager des activités biologiques et chimiques aux interfaces métal-diélectriques. Récemment, cette technique a été combinée à l’holographique numérique (SPR-DHM) pour fournir en temps réel des images de phase produites par la résonance du plasmon de surface (SPR). On dispose ainsi d’une approche plus stable et plus sensible que celle basée sur l'intensité. Nous avons conçu et monté un nouveau microscope SPR-DHM autour d’une diode laser émettant dans le proche infrarouge (NIR) comme source lumineuse. Cela permet de diminuer l'angle de résonance et d’utiliser un objectif d’ouverture numérique (ON) proche de 1.42 au lieu des objectifs d’ON extrêmement élevées. On dispose ainsi d’un système plus accessible. Le microscope NIR SPR-DHM a été utilisé pour observer des interfaces or-air et or-eau. Les hologrammes SPR correspondants ont été enregistrés et reconstruits avec succès, ce qui révèle la potentialité du microscope pour l'imagerie biologique.
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